咱们都清亮团员酶链式响应(Polymerase Chain Reaction ，PCR)天然特异性强、敏锐度高，然则它的优点也会放大咱们操作经过中的某些小弊端色偷偷av男人的天堂京东热，从而导致PCR服从出现各式令人头痛的测验服从，比如非特异性扩增和条带失散等。这两种服从的可能原因在之前的著作中依然扫视先容过了，今天咱们来聊聊出现引物二聚体的可能原因和措置关节！

在体系中添加引物是想要其荟萃到模板链上，进行指标片断的扩增。然则，有些引物绝顶“不自愿”！因为其自身大概其他原因，导致引物的3’端在Taq酶的作用下发生了部分碱基互补，况且沿着引物片断赓续蔓延造成的小片断DNA双链，体现时跑胶服从中等于在几十至一两百bp处出现迷漫状条带暗影。咱们辛艰巨苦费钱合成的引物，又辛艰巨苦、一点不苟添加到体系里，怎么能让它浪掷在引物间自连这种，即影响服从，又浪掷时势的事情上呢！是以咱们要减少引物二聚体的出现！都有什么好主义，快来一路望望吧！

①引物自身没策动好。引物策动的不好，自连所有过高会导致引物二聚体的出现，再行策动引物智商从根柢上措置问题！

②模板。模板有问题，引物荟萃不上去；大概体系中模板的量少，浓度低，都会导致引物“没事干”，引物自连的可能性蹭蹭蹭的往高潮！是以要摸索出相宜这对引物的最好体系。

③Taq酶的量太多，Mg2+的浓渡过高，体系的扩增性能太好了，引物的自连所有也随着变高了，是以一个适当适中的扩增体系短长常必要的。

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④在响应截至后应尽快进行琼脂糖凝胶电泳。有的前辈依然测验过了，扩增产物在室温甩掉本领过长的话Taq酶会将鼓胀的引物合成为二聚体，是以诸君小伙伴要合理安排测验本领，尽量将测验一气呵成，徜徉的本领越久，测验服从的变数也就越大。

⑤以扩增产物为模板进行二次PCR，这么不错提升响应的特异性，减少引物二聚体，然则产物因为进行过反复的扩增，导致其浓度绝顶高，是以使用前不错进行稀释，一般100倍傍边即可，然则也要因为产物的浓度进行调度啦！

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